北京快速赛车几点封盘:VividFISH 染色體FISH計數探針

明亮的熒光探針,用于染色體計數及特定基因座檢測的對照。

產品介紹

 

GeneCopoeia'的熒光原位雜交(FISH)染色體探針是染色體檢測的理想工具。 FISH染色體探針在許多應用上都極有價值,包括:

  • 作為對照探針,與疾病基因的特異(LSI)FISH探針一同使用;
  • 用作染色體計數探針,在癌癥和其他疾病的診斷和預后中鑒定染色體拷貝數;
  • 用作染色體計數探針,在CRISPR/TALEN基因組編輯實驗中鑒定目的染色體的拷貝數。

產品優勢

  • 探針熒光十分明亮,讓染色體檢測變得簡單方便;
  • 每個探針都有不同熒光顏色的版本;
  • 特別適用于在基因組編輯應用中鑒定染色體拷貝數。

 

訂購 VividFISH™ 染色體計數探針 (CEP)

CEP探針作為基因特異探針(LSI探針)的實驗對照,有其重要的意義。CEP探針也可獨立用于染色體檢測,可從總體上檢測染色體異常情況。點擊下列下拉菜單,可查看針對不同人源染色體的VividFISH™探針。每種探針均配有雜交緩沖液。

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人類17號染色體CEP探針
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人類19號染色體CEP探針
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在CRISPR中活用VividFISH

在基因組編輯中活用GeneCopoeia FISH探針

永生化的哺乳動物細胞系為生物醫學和制藥研究提供了方便的模型系統,但它們也經常攜帶3個甚至更多染色體拷貝或基因拷貝(Wistuba等,1998; Burdall等,2003;van Staveren等,2009)。例如,通常使用的人胚胎腎細胞系HEK293就是亞三倍體,染色體核型為64條。而且,絕大部分體外培養的細胞系都不是二倍體, 而是多倍體 。這為要求完全去除內源基因產物的CRISPR應用提出了特殊的挑戰。因此,包括基因拷貝數鑒定在內的篩選方法細化對實驗室培養的哺乳動物細胞基因組編輯是非常有益的。

GeneCopoeia的 VividFISH™染色體計數探針是在基因組編輯應用中鑒定的靶基因拷貝數的強大工具。在進行基因組編輯實驗前使用VividFISH™探針來鑒定目的染色體拷貝數,可以對后續篩選目的修飾陽性克隆有所幫助。為了說明這個概念,GeneCopoeia 使用VividFISH™染色體計數探針對需要進行CRISPR敲除HDAC6基因(位于X染色體)的人滑膜成纖維細胞系MH7A進行了鑒定。我們利用VivdFISH™探針確定了MH7A細胞系攜帶5個X染色體(圖1A)拷貝。這些信息有助于我們篩選出含有5個帶有CRISPR介導移碼突變的HDAC6 基因拷貝的MH7A單克隆穩定細胞系。

 

A  
 
 
B  
 

 

圖1.使用VividFISH™染色體計數探針鑒定哺乳動物細胞系中的5拷貝基因敲除。 A.熒光原位雜交(FISH)分析表明,在MH7A細胞中的有5個HDAC65基因的拷貝。未經基因組編輯MH7A細胞(頂部)和二倍體人細胞系HT1080(底部)與識別X染色體(綠色)以及Y染色體(橙色)的VividFISH™探針進行雜交。只有雄性細胞系HT1080與Y染色體探針發生雜交。細胞核用DAPI(藍色)染色。B. 轉染靶向HDAC6 (NCBI geneID:10013) 基因的Genome-CRISP™ sgRNA表達克隆后后獲得的兩個MH7A 單克隆細胞系的測序結果。每個克隆都含有5個攜帶不同移碼突變的HDAC6 等位基因。