快速赛车走势图:小鼠 ROSA26 safe harbor 基因敲入試劑盒及克隆

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介紹

ROSA26 位點(又稱為 ROSAβgeo26 位點)位于小鼠基因組第6號染色體,最早是在一支名為 ROSAβgeo26 的小鼠品系中被發現的。該品系的小鼠因為一個隨機插入的基因,在所有組織中都能檢測到高水平的β半乳糖苷酶表達。該位點表達一個編碼轉錄本和兩個非編碼的轉錄本,只有非編碼轉錄本的序列受到這個外源插入的干擾。雖然兩個等位區都帶有外源插入片段的純合子小鼠幼崽出生率略低于雜合子幼崽,但純合子幼崽也能正常發育并繁殖。自此,“ROSA26”位點就被用于基因轉入;這個位點的基因敲入對細胞及小鼠的健康無副作用,并能保證轉入基因的正常穩定表達。

特異靶向 ROSA26 位點的 TALEN 或 CRISPR-Cas9 體系能在小鼠第6號染色體上的 ROSA26 位點上生成 DNA 雙鏈斷裂,觸發細胞的 DNA 修復機制,誘導基因組與 ROSA26 供體克隆之間發生同源重組(HR),將供體克隆上的 DNA 片段整合到基因組上的 ROSA26 safe harbor 位點。

購買 貨號 產品 描述 目錄價 促銷價
SH-ROS-K000 Genome-TALER™
小鼠 ROSA26 safe harbor 基因敲入試劑盒(不含載體)
包括:
ROSA26 TALEN 組合 (TN-ROSA26)
ROSA26 陽性對照供體克隆 (DC-RFP-SH02)
基因敲入驗證引物組合(MQPROSHR)
9560 5730
SH-ROS-K002 Genome-CRISP™
小鼠 ROSA26 safe harbor 基因敲入試劑盒(不含載體)
包括:
ROSA26 sgRNA/Cas9 表達克隆 (MCP-ROSA26-CG01)
ROSA26 陽性對照供體克隆 (DC-RFP-SH02)
基因敲入驗證引物組合(MQPROSHR)
9560 5730
SH-ROS-K100 Genome-TALER™
小鼠 ROSA26 safe harbor 基因敲入試劑盒t
包括:
ROSA26 TALEN 組合(TN-ROSA26)
ROSA26 供體克隆載體 (DC-DON-SH02)
ROSA26 陽性對照供體克隆 (DC-RFP-SH02)
基因敲入驗證引物組合(MQPROSHR)
11160 6680
SH-ROS-K200 Genome-CRISP™
小鼠 ROSA26 safe harbor 基因敲入試劑盒
包括:
ROSA26 sgRNA/Cas9 表達克隆 (MCP-ROSA26-CG01)
ROSA26 供體克隆載體 (DC-DON-SH02)
ROSA26 陽性對照供體克隆 (DC-RFP-SH02)
基因敲入驗證引物組合(MQPROSHR)
11160 6680

 

購買 貨號 產品 描述 目錄價
EZ013 ROSA26 Cas9 knock-in clone ROSA26 Gateway 供體載體,可裝載外源ORF并將其敲入safe harbor位點。 3400
SH150 ROSA26 sgRNA/Cas9 clone 靶向剪切小鼠 6 號染色體的ROSA26位點。(舊貨號:MCP-ROSA26-CG01) 7160
SH175 ROSA26 TALEN clone 靶向剪切小鼠 6 號染色體的ROSA26 位點。(舊貨號:TN-ROSA26) 7160
SH250 ROSA26 Cas9 knock-in clone ROSA26 經典克隆供體載體,可裝載外源ORF并將其敲入safe harbor位點。(舊貨號:DC-DON-SH02) 3400
SH358 ROSA26 positive control clone 將RFP熒光蛋白敲入小鼠 6 號染色體上的ROSA26 位點,作為對照。(舊貨號:DC-RFP-SH02) 3960
SH450 ROSA26 safe harbor 5端重組驗證引物 通過PCR驗證小鼠ROSA26 safe harbor基因敲入的5端重組區。(舊貨號:MQPROSHR-5) 200
SH451 ROSA26 safe harbor 3端重組驗證引物 通過PCR驗證小鼠ROSA26 safe harbor基因敲入的3端重組區。(舊貨號:MQPROSHR-3) 200

 

購買 貨號 產品 描述 目錄價
SH350 Cas9 knock-in clone to ROSA26 ORF區為 Cas9 核酸酶基因,由 CBh 啟動子啟動表達。能將Cas9 核酸酶基因整合到小鼠 ROSA26 位點。 4000
SH351 Cas9 knock-in clone to ROSA26 ORF區為 Cas9 核酸酶基因,由 CBh 啟動子啟動表達。能將Cas9 核酸酶基因整合到小鼠 ROSA26 位點。 4000
SH352 Cas9 knock-in clone to ROSA26 ORF區為 Cas9 核酸酶基因,由 CBh 啟動子啟動表達。能將Cas9 核酸酶基因整合到小鼠 ROSA26 位點。 4000

 

購買 貨號 產品 描述 目錄價
SH452 Cas9 ROSA26 safe harbor 敲入 3端重組驗證引物 通過PCR驗證小鼠ROSA26 safe harbor基因敲入的3端重組區。 200
SH453 Cas9 ROSA26 safe harbor 敲入 5 端重組驗證引物 通過PCR驗證小鼠ROSA26 safe harbor Cas9 基因敲入的5端重組區。 200

 

購買 Catalog Product Name Description Price
SH062 Genome-CRISP™ Cas9 小鼠 ROSA26 safe harbor 基因敲入試劑盒 - Puro 包括:
ROSA26 sgRNA/Cas9 表達克隆 (SH150)
Cas9 ROSA26 敲入克隆 - Puro (SH350)
敲入驗證引物組合(SH452 & SH453)
12760
SH063 Genome-CRISP™ Cas9 小鼠 ROSA26 safe harbor 基因敲入試劑盒 - Hygro 包括:
ROSA26 sgRNA/Cas9 表達克隆 (SH150)
Cas9 ROSA26 敲入克隆 - Hygro (SH351)
敲入驗證引物組合(SH452 & SH453)
12760
SH064 Genome-CRISP™ Cas9 小鼠 ROSA26 safe harbor 基因敲入試劑盒 - Neo 包括:
ROSA26 sgRNA/Cas9 表達克隆 (SH150)
Cas9 ROSA26 敲入克隆 - Neo (SH352)
敲入驗證引物組合(SH452 & SH453)
12760
SH087 Genome-TALER™ Cas9 小鼠 ROSA26 safe harbor 基因敲入試劑盒 - Puro 包括:
ROSA26 TALEN 組合 (SH175)
Cas9 ROSA26 敲入克隆 - Puro (SH350)
敲入驗證引物組合(SH452 & SH453)
12760
SH088 Genome-TALER™ Cas9 小鼠 ROSA26 safe harbor 基因敲入試劑盒 - Hygro 包括:
ROSA26 TALEN 組合 (SH175)
Cas9 ROSA26 敲入克隆 - Hygro (SH351)
敲入驗證引物組合(SH452 & SH453)
12760
SH089 Genome-TALER™ Cas9 小鼠 ROSA26 safe harbor 基因敲入試劑盒 - Neo 包括:
ROSA26 TALEN 組合 (SH175)
Cas9 ROSA26 敲入克隆 - Neo (SH352)
敲入驗證引物組合(SH452 & SH453)
12760

 

貨號 產品 描述 目錄價
多種 小鼠 ROSA26 ORF 敲入克隆 由 CMV 啟動子啟動 ORF 表達。能將 ORF 或您的目的基因敲入小鼠 ROSA26 safe harbor 位點。

 

TALEN 試劑盒

Genome-TALER™ 小鼠 ROSA26 safe harbor 基因敲入試劑盒能通過 TALEN 介導的同源重組將您的目的基因、篩選標記及其他遺傳因子敲入小鼠基因組上的 ROSA26 位點。試劑盒包含1對 ROSA26 TALEN 質粒,1個 ROSA26 供體克隆載體或供體克隆*,1個陽性對照供體克隆及兩對基因敲入PCR 驗證引物組合。

(A)  
mROSA26-left-talen mROSA26-right-talen
     
mROSA26-donor-control pDonor-ORF-sh02  
(B)

圖1. Genome-TALER™ 小鼠 ROSA26 safe harbor 基因敲入試劑盒。該試劑盒包含(A) (B) 。(A) ROSA26 TALEN 及供體DNA質粒;(B) ROSA26 基因敲入 驗證PCR引物組合。

 

組成 描述 數量

ROSA26 TALEN 組合 – ROSA26 左側 TALEN 及 ROSA26 右側 TALEN

特異剪切 ROSA26 靶標位點,產生雙鏈斷裂

1 對

ROSA26 供體克隆載體

ROSA26 供體克隆*

用于克隆或已裝載目標基因–兩側帶有 ROSA26 同源重組位點

-含CMV啟動子

-GFP報告基因/嘌呤霉素篩選標記

1

ROSA26 陽性對照供體克隆

裝載RFP而非目標基因。用作陽性對照。

1

基因敲入驗證引物組合

對同源重組連接位點進行擴增的PCR引物組合,用于驗證成功整合的克隆。

2 對

* 客戶可另外定制 ROSA26 供體克隆。該供體克隆可取代原來的空白 ROSA26 供體載體隨試劑盒發貨。

 

(A) (B)
The_comparison_chart1-s
(C)
 

圖2. 小鼠基因組 ROSA26 safe harbor 基因敲入 (A) 于6孔板中用 ROSA26 陽性對照供體質粒DC-RFP-SH02 (800 ng) 與 ROSA26 TALEN 質粒對(各600 ng) 共轉染或只用 ROSA26 陽性對照供體克隆轉染小鼠Neuro2a 感受態細胞. (B) 轉染48小時后,將細胞以1:10比例分。配到新的6孔板,用1.0 µg/ml 濃度的嘌呤霉素進行篩選該圖于篩選進行兩周后拍攝。 只轉染 DC-RFP-SH02 的對照組板孔內只余極少量細胞。 (C) (D) 設計引物組合對同源重組連接位點進行擴增,驗證成功整合的克隆。

CRISPR 試劑盒

Genome-CRISP™ 小鼠 ROSA26 safe harbor 基因敲入試劑盒能通過 CRISPR-Cas9 介導的同源重組將您的目的基因、篩選標記及其他遺傳因子敲入小鼠基因組上的 ROSA26 位點。試劑盒包含1個 ROSA26 sgRNA/Cas9 表達克隆,1個 ROSA26 供體克隆載體或供體克隆*,1個陽性對照供體克隆及兩對基因敲入PCR 驗證引物組合。

(A)  
mROSA26-right-talen
     
mROSA26-donor-control pDonor-ORF-sh02  
(B)

 

圖3. Genome-CRISP™ 小鼠 ROSA26 safe harbor 基因敲入試劑盒。該試劑盒包含(A) (B) 。(A) ROSA26 sgRNA/Cas9 表達克隆及供體DNA質粒;(B) ROSA26 基因敲入驗證PCR引物組合。

 

組成 描述 數量

ROSA26 sgRNA/Cas9 表達克

表達 sgRNA 及 Cas9 核酸內切酶特異剪切 ROSA26 位點,生成雙鏈斷裂

1

ROSA26 供體克隆載體

ROSA26 供體克隆*

用于克隆或已裝載目標基因–兩側帶有 ROSA26 同源重組位點

-含CMV啟動子

-GFP報告基因/嘌呤霉素篩選標記

1

ROSA26 陽性對照供體克隆

裝載RFP而非目標基因。用作陽性對照。

1

基因敲入驗證引物組合

對同源重組連接位點進行擴增的PCR引物組合,用于驗證成功整合的克隆。

2 對

* 客戶可另外定制 ROSA26 供體克隆。該供體克隆可取代原來的空白 ROSA26 供體載體隨試劑盒發貨。

 

(A) (B)
The_comparison_chart1-s
(C)
 

圖4. 小鼠基因組 ROSA26 safe harbor 基因敲入 (A) 于6孔板中用 ROSA26 陽性對照供體質粒DC-RFP-SH02 (800 ng) 與 ROSA26 sgRNA/Cas9 表達克?。?00 ng) 共轉染或只用 ROSA26 陽性對照供體克隆轉染小鼠Neuro2a 態細胞. (B) 轉染48小時后,將細胞以1:10比例分。配到新的6孔板,用1.0 µg/ml 濃度的嘌呤霉素進行篩選該圖于篩選進行兩周后拍攝。 只轉染 DC-RFP-SH02 的對照組板孔內只余極少量細胞。 (C) (D) 設計引物組合對同源重組連接位點進行擴增,驗證成功整合的克隆。

敲入克隆

小鼠ROSA26 Safe Harbor ORF 敲入克隆是裝載客戶感興趣的基因 ORF 的 ROSA26 供體克隆。該供體克隆可搭配 Genome-TALER™ 或 Genome-CRISP™ 小鼠 ROSA26 Safe Harbor 基因敲入試劑盒使用,將客戶感興趣的 ORF 特異敲入位于小鼠第6號染色體上的 ROSA26 位點。試劑盒中的 TALEN 或 CRISPR-Cas9 體系靶向剪切 ROSA26 位點, 產生 DNA 雙鏈斷裂(DSB),使該位點發生同源重組(HR)。目前這一系列敲入克隆有超過20,000條序列確證的小鼠 OFR 可供選擇。

 

AAVS1_Donor_clone-m

 

圖5. 小鼠ROSA26 Safe Harbor ORF 敲入克隆質粒圖譜

 

ROSA26 供體克隆客戶定制服務

GeneCopoeia 也提供 ROSA26 供體克隆客戶定制服務,為客戶構建含有突變基因或其他遺傳因子的敲入克隆,用于針對 ROSA26 位點的基因敲入實驗。請點擊這里詢價。

如有進一步疑問,請致信 [email protected] 或致電 4006-020-200 咨詢。

服務

mROSA26 donor clone custom services

GeneCopoeia 也提供小鼠 ROSA26 供體克隆客戶定制服務,為客戶構建含有小鼠 ORF,突變基因或其他遺傳因子的敲入克隆,用于靶向 ROSA26 位點的基因敲入實驗。請點擊這里詢價。

如有進一步疑問,請致信 [email protected] 或致電 1-866-360-9531 咨詢。

 

服務 描述 應用

穩轉細胞株服務

單克隆細胞株

定制帶有 TALEN 或 CRISPR-Cas9 介導的safe harbor 位點基因敲入的單克隆穩轉細胞株。 TALEN, CRISPR-Cas9 人類 AAVS1, 小鼠 ROSA26

細胞庫

為帶有 TALEN 或 CRISPR-Cas9 介導的safe harbor 位點基因敲入的單克隆穩轉細胞株建庫 TALEN, CRISPR-Cas9 人類 AAVS1, 小鼠 ROSA26

轉基因小鼠服務

轉基因小鼠

定制帶有 TALEN 或 CRISPR-Cas9 介導的 ROSA26 位點基因敲入的轉基因小鼠。

TALEN, CRISPR-Cas9 小鼠 ROSA26

 

相關服務

人類 AAVS1 safe harbor 基因敲入試劑盒及克隆

Genome-TALER™ 及 Genome-CRISP™ 人類 AAVS1 safe harbor 基因敲入試劑盒 – 試劑盒能通過 TALEN 或 CRISPR-Cas9 介導,將您的目的基因、篩選標記及其他遺傳因子特異敲入人類第19號染色體上的 AAVS1 safe harbor 位點。我們有超過20,000條經過序列確證的人類ORF可用于構建 AAVS1 ORF 供體克隆。AAVS1 位點的安全整合能保證敲入基因被正常轉錄,并對細胞無已知的副作用。

 

TALE 及 CRISPR-Cas9 基因組編輯工具

Genome-TALER™ TALEN 及 TALE-TF 客戶定制服務 – GeneCopoeia提供TALENs,TALE-TFs和其他基于TALE的靶向基因組修飾因子的設計,構建和驗證服務。服務層次選擇豐富,價格合理。

Genome-CRISP™ CRISPR-Cas9 產品及服務 – GeneCopoeia提供CRISPR-Cas9 sgRNA 設計及克隆服務,Cas9表達克隆和其他相關產品及服務,為客戶實現簡便快捷的靶向基因組編輯。