快速赛车比赛视频:轉基因小鼠服務

介紹

GeneCopeia 提供原核顯微注射法生成的帶有 CRISPR 或 TALEN 介導的基因組修飾小鼠。我們能提供帶有基因敲除、基因敲入或轉基因等多種基因組修飾的小鼠模型,為您的基因研究、藥物或療法研究等工作提供強大的支持。

優勢

  • 成功案例(圖1)。
  • 通過CRISPR-Cas9技術及原核顯微注射法快速構建小鼠品系(圖2)。最快6個月即能獲得F1代轉基因小鼠。
  • 深入的項目咨詢服務。
  • 專業的CRISPR克隆設計、構建及小鼠顯微注射服務。
  • 可與GeneCopoeia Genome-CRISP™ ROSA Safe Harbor敲入克隆配合使用。

 

成功案例:通過 GeneCopoeia CRISPR 轉基因小鼠服務構建融合標簽小鼠品系

圖 1. 用GeneCopoeia CRISPR技術為小鼠的染色體基因加上GFP融合標簽。將Cas9 mRNA、sgRNA及靶向M. musculus P2xr2 基因(NCBI gene ID: 231602)的供體質粒注射到單細胞階段的小鼠胚胎中。CRISPR-Cas9介導未經編輯的染色體序列與同源供體之間發生同源重組,在目的基因的3‘轉入GFP融合標簽的基因。編輯陽性的founder小鼠通過PCR和測序方法進行確診。圖中灰色方塊為P2xr2基因的外顯子。

 

圖2. 生成帶有TALEN 或 CRISPR-Cas9 介導的基因組修飾的轉基因小鼠模型。

 

參考文獻:

1.Knockout mice by TALEN-mediated gene targeting.Nature Biotrchnology.2012,31,23-24

2.Generation of gene-modified mice via Cas9/RNA-mediated gene targeting.Cell Research.2013,23,720-723.

3.One-Step Generation of Mice Carrying Mutations in Multiple Genes by CRISPR/Cas-Mediated Geneme Engineeing.Cell 2013,153,1-9.

應用

GeneCopeia 為客戶提供帶有 CRISPR-Cas9 或 TALEN 介導的基因組修飾的小鼠。基因組修飾的類型包括組成型基因敲除、條件性基因敲除、組成型基因敲入、人源化及轉基因等。

 

組成型基因敲除

我們可以通過在基因序列上誘導插入/缺失造成移碼(無供體DNA)實現基因敲除,也可以通過誘導染色體與帶有移碼突變的供體DNA之間發生同源重組(HR)來實現基因敲除的效果。這段帶有移碼突變的供體DNA可以是一個帶有篩選標記表達結構的質?;蛘呤且歡喂丫酆塑賬?。通過以上兩種方法構建的敲除小鼠所有細胞在任意發育階段都帶有目的的敲除突變,其敲除效果是永久性的,并且可以傳代。

 

條件性基因敲除

我們可以在供體克隆的篩選標記表達結構及/或關鍵外顯子序列兩側加上LoxP重組位點,通過同源重組將這段序列敲入基因組靶點來構建條件性敲除小鼠模型。這類小鼠模型與Cre 轉基因小鼠交配后,所繁殖的后代小鼠體細胞內會啟動Cre 介導的序列敲除,生成LoxP 重組位點之間的序列區被特異敲除的基因敲除小鼠。

 

 

組成型基因敲入

通過構建基因敲入小鼠模型,我們可以根據需要在小鼠的基因組靶點上引入點突變,或者將外源基因片段敲入特定的基因組位點模擬某種遺傳疾病,或者通過報告基因或融合標簽跟蹤基因的表達。

 

人源化小鼠

人源化小鼠是指帶有功能完整的人類基因、細胞或組織的小鼠模型。這些人類基因在小鼠基因組調控序列的控制下進行表達。人源化小鼠為人類疾病研究提供了一個強而有力的工具。

 

轉基因小鼠 (ROSA26)

小鼠 ROSA26 位點是一個經過確證的“安全港(safe harbor)”位點。在 ROSA26 位點轉入外源基因對小鼠的健康沒有明顯的不良影響,也能保證轉入基因的穩定表達,因此這個位點是整合轉基因片段的理想選擇。我們可以為你構建轉基因小鼠品系,在模型小鼠的 ROSA26 位點插入您的目標基因(及報告基因等)。

訂購

GeneCopoeia 可根據您的實驗需求構建轉基因小鼠模型。這些 F1 代陽性小鼠基因組上帶有您所需的基因敲除、敲入及轉基因等基因組修飾。這些基因組修飾通過 TALEN 或 CRISPR-Cas9 技術介導生成,永久性存在于小鼠基因組序列并可以在品系中進行傳代。除此以外,GeneCopoeia 還提供基因組編輯項目咨詢服務。如需詢價,請填寫以下表格。

 

 

服務內容

  • 3只(或更多)帶 TALEN 或 CRISPR-Cas9 介導的基因組修飾的 F1 代陽性小鼠
  • 服務報告

 

預計到貨時間

  • TALEN 或 CRISPR-Cas9 介導的轉基因小鼠:6-9 個月

 

 

相關服務

 

Genome-TALER™ TALEN 及 TALE-TF 客戶定制服務 – GeneCopoeia提供TALENs,TALE-TFs和其他基于TALE的靶向基因組修飾因子的設計,構建和驗證服務。服務層次選擇豐富,價格合理。

Genome-CRISP™ CRISPR-Cas9 產品及服務 – GeneCopoeia提供CRISPR-Cas9 sgRNA 設計及克隆服務,Cas9表達克隆和其他相關產品及服務,為客戶實現簡便快捷的靶向基因組編輯。

Genome-TALER™ 及 Genome-CRISP™ 人類 AAVS1 safe harbor 基因敲入試劑盒 –  試劑盒能通過 TALEN 或 CRISPR-Cas9 介導,將您的目的基因、篩選標記及其他遺傳因子特異敲入人類第19號染色體上的 AAVS1 safe harbor 位點。我們有超過20,000條經過序列確證的人類ORF可用于構建 AAVS1 ORF 供體克隆。AAVS1 位點的安全整合能保證敲入基因被正常轉錄,并對細胞無已知的副作用。

Genome-TALER 及 Genome-CRISP™ 小鼠 ROSA26 safe harbor 基因敲入試劑盒 –  試劑盒能通過TALEN或CRISPR-Cas9介導,將您的目的基因、篩選標記或其他遺傳因子特異敲入小鼠基因組中的ROSA26 safe harbor 位點。這樣的安全敲入能保證轉入基因的轉錄活性,并對細胞無已知的副作用。